1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
农药在环境和食品中的残留，不仅对人类健康造成了长期的潜在危害，而且对我国农产品的出口产生了巨大的冲击。现代社会人们对于环境的要求越来越高，对高效低毒的绿色农药的需求也越来越迫切。新烟碱类杀虫剂是继有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类杀虫剂之后的第四代杀虫剂。由于其具有低毒靶标独特、应用方法多样等特点，使得它们成为农业生产中具有广泛用途的一类杀虫剂。氯噻啉是新烟碱类杀虫剂中的重要品种。
氯噻啉是江苏省南通市江山农药化工股份有限公司自行研制开发的一种新烟碱类杀虫剂，作用于烟酸乙酰胆碱酯酶受体的新烟碱类内吸性杀虫剂，可用于防治吮吸式口器害虫，如蚜虫、叶蝉、飞虱、蓟马、粉虱及其抗性品系，同时对鞘翅目、双翅目和鳞翅目害虫也有防效，尤其对水稻二化螟、三化螟的毒力比其他烟碱类杀虫剂高，广泛应用于水稻、小麦、蔬菜、烟草、果树、茶树等作物上，具有高效、光谱、低毒等优点。作为高毒农药的代替品种，氯噻啉的使用量日益上升，且随着人们对食品安全关注程度的增强，对其在农产品和环境中残留检测方法的研究也已广泛开展[1,2]。
目前，对氯噻啉残留的检测主要依赖高效液相色谱法( HPLC)。贺敏等[3]建立了水稻中氯噻啉残留的分析方法，在稻田水、茎叶、稻壳和土壤中的最低检测浓度分别为 0.0004、0.01、0.02和0.005mg/kg; 张丽芬[4]建立了甘蓝中氯噻啉残留的分析方法,其最低检测浓为3.2 mg/kg。由于常规仪器分析方法难以满足大批量样品的检测，因此开发高效、快速、灵敏的检测方法显得十分必要。农药残留的快速检测方法有很多，其中免疫学技术在农药残留检测中的发展较快，应用也逐渐广泛起来。它具有灵敏、快速、特异性强、分析容量大、安全可靠等优点，非常适宜于复杂基质中痕量组分的分析和现场快速检测。李明等[5]建立了量子点荧光免疫分析方法同时检测环境和农业中的噻虫胺和噻虫啉，第一次使用量子点荧光免疫的方法同时检测环境中的两种农药。荧光偏振免疫分析是免疫分析技术的一种，该技术是将高灵敏的发光检测与高特异性的免疫反应相结合，用于检测各种抗原、半抗原、抗体、酶和药物等的分析技术。是继放射免疫分析、酶联免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。其检测灵敏度高，线性范围宽，分析方法简便快捷，仪器简单实用。其中Jolley 等[6]第一次应用 FPIA 方法检测人血清中的氨基糖甙类抗生素，可以认为是 FPIA 方法在药物检测中应用的开端。上世纪80年代，Abbott公司开发出一种 Abbott TDx自动荧光偏振测量系统，并实现了商品化，用于血液中治疗性药物的检测。Lukens等[7]在1977年检测了农药苯菌灵(Benomyl)的主要代谢物2-氨基苯并咪唑。Colbert [8]第一次用 FPIA 进行农药残留检测，他们建立了一种在血液中检测百草枯的方法。近年来，国外有关应用于临床检验、毒品分析、农药残留量分析、环境和食品监测等方面的 FPIA方法的报道逐年增加，各种方法相继建立并已逐步推广应用。但目前未见荧光偏振免疫分析在农药残留检测中应用的报道。本研究首次制备了氯噻啉半抗原和多克隆抗体，建立了快速灵敏的氯噻啉残留PFIA检测分析方法。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
利用实验室现有氯噻啉的半抗原以及多克隆抗体，建立氯噻啉荧光偏振免疫分析方法。
研究内容：
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案：
1. 标记半抗原并纯化
采用DCC的方法将AMF和EDF两种荧光物质分别标记氯噻啉半抗原上，并通过薄层层析色谱纯化，于-4℃保存待用。
4. 研究创新点
本课题以氯噻啉为研究对象，采用荧光偏振免疫技术建立残留检测体系，是一种新的农药残留检测技术，它完全在均相溶液系统内完成反应，易于自动化，为化学农药的残留免疫分析开创新的研究思路，为小分子化合物的定性定量检测提供快速、灵敏、可靠的技术手段。
5. 研究计划与进展
2014年8月--9月 利用DCC法将AMF以及EDF分别标记到氯噻啉半抗原上，再通过薄层层析色谱板纯化抗体。
2014年9月--10月 从包被原浓度、抗体浓度和缓冲液配比三个方面优化反应条件，确定最优反应条件。
2014年11月--12月 进行氯噻啉在田水、土壤、糙米、西红柿、甘蓝中的添加回收试验，用FPIA方法检测并计算添加回收率。2014年12月 配制氯噻啉标准样品，用气相色谱进行检测，计算添加回收率，与FPIA方法比较，评价FPIA方法。
