1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.1小麦白粉病危害
小麦白粉病是由小麦白粉病菌(Blumeria graminis f.sp. tritici, Bgt,禾布氏白粉菌小麦专化型)引起的一种世界性病害,严重影响小麦的品质和产量[1]。在中国的北部冬麦区和黄淮冬麦区,白粉病是最重要的小麦病害;长江中下游和西南麦区,白粉病是仅次于赤霉病或条锈病的第二大病害[2]。近年来,随着水肥条件的改变以及病菌生理小种的变异,其发生范围逐渐向全国蔓延,发病面积逐年扩大,2014年发病面积达到666.7万hm2[3],白粉病发生造成每年小麦产量损失超过1000吨[4]。小麦白粉病主要危害叶片,严重时也会危害到叶鞘、茎和穗等部位[5]。近年来,小麦白粉病菌给我国的小麦生产造成了巨大的经济损失,己成为威胁小麦安全生产的主要病害之一,过量使用氮肥和加大种植密度等措施给白粉病菌的发展和流行创造了不少有利的条件,另外,小麦白粉病菌生理小种多,具有分化现象明显,适应范围广、群体毒性变异速度快等特点也是其发展如此迅速的原因之一[6]。对白粉病的防治坚持预防为主,即培育和推广抗病品种。目前小麦抗白粉病育种的研究任务是进一步挖掘小麦本身及近缘种属的有效基因,增加品种及抗源的多样化,尝试不同抗病基因的聚合育种,延长品种的使用寿命,重视中抗和慢病品种的筛选和鉴定,并将其应用于育种实践中[7]。抗白粉病基因筛选是抗病育种的前提和基础。
1.2国内外关于抗病基因克隆和功能验证技术VIGS的研究进展
2. 研究的基本内容和问题
2.1 研究目标
利用VIGS技术从候选基因中筛选小麦白粉病抗病相关基因。
2.2 研究内容
3. 研究的方法与方案
3.1 实验方案
3.1.1 提取簇毛麦总RNA
提取出的RNA加入30-50μl DEPC水溶解,于-70℃保存备用。
4. 研究创新点
利用病毒诱导基因沉默实验验证候选基因在抗小麦白粉病中是否起作用。
5. 研究计划与进展
2015年7月至10月,提取植物RNA,并将提取的将提取的RNA反转录(RT-PCR)成cDNA。熟悉试验材料、仪器及实验技术。
2015年10月至2016年2月,进行VIGS实验,确定候选基因的作用。
2016年2月至4月,论文撰写以及实验结果补充。