1. 研究目的与意义
课题内容:本课题主要针对口腔上皮细胞中基因组DNA两种提取方法效果的对比研究。
首先收集口腔拭子样本;其次对其分别按柱提法和磁珠法的操作步骤进行裂解、降解、分离、纯化,得到基因组DNA; 并进行定性和定量的检测,最后进行结果分析,对比两种方法提取口腔上皮细胞基因组DNA的优缺点及稳定性。
意义: 随着分子生物学及医学的快速发展,人们对基因组DNA的研究越来越深入:其一,可以用来进行科学研究。
2. 文献综述
口腔上皮细胞DNA的两种提取方法对比研究摘 要:口腔上皮细胞主要由细胞核与细胞质构成,表面有细胞膜,具有价廉易得、较长时间存储、无创伤、适应性好等优点,是近年来提取基因组DNA比较优越的素材之一。
本文对口腔上皮细胞基因组DNA的简介、发展趋势、提取方法和研究意义等方面进行论述。
关键词:口腔上皮细胞;基因组DNA;柱提法;磁珠法1.基因组DNA简介脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid,DNA)是染色体最主要的化学成分,也是组成基因的材料。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:一、口腔黏膜样本的处理柱提法: 把口腔拭子转移至离心管中。
加入裂解液和 蛋白酶K,涡旋混匀。
56℃振荡温浴1小时。
4. 工作计划
19.02.14-19.02.28查阅整理课题相关文献资料19.03.01-19.03.12整理文献资料,完成文献综述19.03.13-19.03.20熟悉课题实验方案,完成开题报告19.03.21-19.04.15口腔黏膜基因组DNA的提取19.04.16-19.05.15两种方法提基因组DNA的分析比较19.05.16-19.05.31整理总结实验数据,撰写毕业论文
5. 难点与创新点
口腔上皮细胞作为样本,其基因多态性检测结果与全血标本的DNA分析结果完全一致,且方法十分简便、快速,没有创伤,不需要消毒,特别适用于不方便采血的人群。
基因组DNA的提取和纯化是比较耗时、繁琐的过程,并且提取的结果直接影响着下游实验如基因测序等的成败。
柱提法和磁珠法试剂盒,是目前商品化试剂盒中最常见的两种。
