1. 研究目的与意义
一、研究内容通过行为学指标评价透骨草对急性炎症疼痛的镇痛作用和探讨NF-κB信号通路对透骨草在急性炎症疼痛小鼠中抗炎镇痛作用的影响。
其中包括以下实验:1.小鼠随机分组2.小鼠行为学基线的测量:包括机械缩足反射阈值,热潜伏期的测定3.对小鼠进行连续7天的灌胃给药4.小鼠formalin急性炎症疼痛模型的制备5.Formalin模型自发痛行为评价6.对小鼠进行行为学实验:包括机械缩足反射阈值,热潜伏期的行为评价7.取材8.检测指标二、研究意义透骨草是大戟科地构叶属植物地沟叶speranskia tuberculata(bunge.)Baill的全草,还可以称之为接生草与老婆子针线,主产与内蒙古,河南,山东,江苏等地区,在林下,山坡,及草地等随处可见。
该药在《本草纲目》、《本草原始》中均有记载,他的主要化学成分有:生物碱、有机酸等。
2. 文献综述
动物药的镇痛研究徐梓铖 047214141摘 要:随着医药行业的发展与进步,人类对于抵抗疼痛这方面做得也是越来越好,但仍有许多人遭受疼痛的困扰,数据显示约35%的人患有慢性疾病,世界上每天约500万人忍受疼痛的折磨,中国城市居民中大约57%的人经历过头痛[1]。
因此,镇痛药是至关重要的。
镇痛药有两类,一类是作用于中枢神经系统的中枢性镇痛药,其作用于阿片受体,另一类则是作用于外周神经的解热镇痛药。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:1. 小鼠分组:取25只雄性小鼠,随机分组,每组5只,分别为对照组,模型组,药物组。
2. 小鼠行为学基线的测量2.1 机械缩足反射阈值测定:安静坏境下,小鼠置于底为网格的特制的有机玻璃盒子内,适应20min后,将一细丝刺激小鼠后脚掌中部皮下,观察其缩足反应。
刺激2次,每次记录小鼠的受刺激时间,前后两次间隔1min,之后取两次平均值。
4. 工作计划
第一阶段:2022.1.1~1.15 练习热板、扎脚、甩尾小鼠行为学的测试,小鼠灌胃给药练习。
同时查阅文献,确定研究方向,规划实验方案。
第二阶段:2022.1.14.~20 开始实验,随机挑选25只老鼠后分组,测量基线后连续给药7天第三阶段:2022.1.20~1.26 制备formalin急性炎症疼痛模型并进行自发痛行为评价,4h后进行行为学检测第四阶段:2022.1.26 检测完最后一次行为学后取小鼠脊髓并冰冻储存第五阶段:2022.3~2022~4 进行分子生物学实验检测指标,探讨某个信号通路在透骨草对急性炎症疼痛小鼠中抗炎镇痛作用的影响。
5. 难点与创新点
透骨草的化学成分有生物碱、有机酸等。
在以往的研究报告中,不乏对透骨草镇痛作用的研究,但鲜有研究深入挖掘透骨草镇痛的分子机制。
因此,本次实验将通过行为学方法观察透骨草的镇痛作用,并基于NF-κB-COX-2信号通路探索透骨草镇痛作用的相关机制。
