1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
乳房炎是一种常见的奶牛疾病，也是影响世界乳品工业的主要疾病之一，给世界奶产量造成了很大的损失[1]。该病对奶牛产业的主要危害表现为使奶产量和乳汁品质下降[2]，每年全球因乳房炎造成的经济损失高达数百亿美元[3]。很多研究者对乳房炎的病因，细菌的分离鉴定、发病机制、病理变化、临床诊断，实验室诊断及治疗都做了大量的研究。在治疗方面，因抗生素被吸收后在牛奶中有药物残留问题，作为主导治疗的抗生素疗法已经受到质疑。
临床急需方便、易行且经济的方法来治疗或预防奶牛乳房炎。对乳房炎发病机理的研究结果认为，防治乳房炎不能仅限于改善饲养管理，严格遵守挤奶操作规程还可以通过提高奶牛的天然抗病能力和奶牛乳房炎的非抗生素疗法进行防治，这已经成为国内外学者的研究热点。
引起乳房炎的病原可分为细菌、病毒、支原体、真菌等四大类，其中大部分是细菌。由革兰氏阳性菌（G ）葡萄球菌、链球菌和革兰氏阴性菌（G-）大肠杆菌引起的乳房炎占总发病率的90%以上[4]。LTA是革兰氏阳性菌的特有结构，阐明LTA对小鼠乳腺组织中功能受体TLR2介导的炎症信号通路的影响，可为寻找新的乳房炎治疗干预措施提供思路。
2. 研究的基本内容和问题
本实验通过用LTA对泌乳小鼠乳腺灌注方法，建立革兰氏阳性菌引起的乳房炎模型，使用半定量RT-PCR的方法、病理组织切片和HE染色方法，检测炎性通路中TLR2表达量、细胞因子IL-1、IL-6的表达量以及灌注后乳腺组织不同时间的病理变化情况。为进一步探索革兰氏阳性菌引起的奶牛乳房炎的研究提供一定的理论依据。
3. 研究的方法与方案
研究方法：
（1）购买泌乳期小鼠24只，适应性饲喂1周后，随机分成8组，每组3只。其中4组为实验组，4组为对照组。实验组为：T1组1.5h（n=4）、T2组3h（n=4）、T3组6h（n=4）、T4组12h（n=4）；对照组为C1组1.5h（n=2）、C2组3h（n=2）、C3组6h(n=2)、C4组12h(n=2)。通过对实验组小鼠乳腺灌注浓度为30μL/ml LTA，对照组灌注等量的生理盐水溶液，建立乳腺炎动物模型，获取不同时间段（1.5h、3h、6h、12h）乳腺组织样品。
（2）每次取样，一部分经液氮冻存组织匀浆，用于半定量RT-PCR检测TLR2、IL-1和IL-6 mRNA基因的表达；一部分存于中性甲醛，用于HE染色观察组织病理变化。
4. 研究创新点
特色或创新之处：
（1）建立泌乳期小鼠的乳腺炎模型
（2）阐明LTA对小鼠乳腺组织中功能受体TLR2介导的炎症信号通路的影响，从炎性通路入手解决乳房炎，而非再发病后进行治疗,可为寻找新的乳房炎治疗干预措施提供思路。
5. 研究计划与进展
2014年02月2014年03月
查阅文献资料资料，完成试剂和实验小鼠的采购
2014年03月2014年04月
