1. 研究目的与意义
自50 年代末，Bender 等首先对出芽茁霉(pullularia pullulans)——一种不完全菌产生的粘多糖普鲁兰(又称茁霉多糖)的结构进行了研究，发现这是一种以α-1 , 6 糖苷键将麦芽三糖头尾相连而形成的多糖。
1961 年，Bender 等进一步发现由产气气杆菌(Aerobacteraerogenes)所产生的细胞外酶———普鲁兰酶(又称茁霉多糖酶)可以切断普鲁兰中的α—1 , 6糖苷键，而使普鲁兰转化成麦芽三糖。
普鲁兰酶能够专一催化支链淀粉型多糖α-1 , 6 糖苷键的水解，从而使支链淀粉型多糖的分支链脱离主链形成一系列链长不一的直链淀粉。
2. 研究内容和预期目标
1. 一株土壤高产普鲁兰酶产生菌进行诱变
2. 土壤高产普鲁兰酶诱变菌的酶动力学测定
3. 研究的方法与步骤
1、实验材料
1.1试剂与设备
普鲁兰糖(Pullulan)，支链淀粉，Sigma公司；可溶性淀粉，蛋白胨，酵母膏，酵母粉，上海生工；3，5-二硝基水杨酸，广东光华化学厂有限公司；琼脂粉，广东环凯微生物科技有限公司；其他试剂均为分析纯。
实验仪器和设备：灭菌锅(HVE，日本Hirayama公司)；高速冷冻离心机(Sigma2-16，德国Sigma公司)；精密数显酸度计(Delta320-S，上海梅特勒-托利多仪器厂)；电子天平(AR2140，奥豪斯国际贸易有限公司)；数字显示电热培养箱(宁波海曙赛福实验仪器厂)；高压蒸汽灭菌锅(HVE，日本Himyama公司)；自动双重纯水蒸馏器(1810B，上海晶凌玻璃有限公司)；恒温摇床(HQ45HYA，中国科学院武汉科学仪器厂)；水浴锅(LVF6，Grant Instruments(Cambrige)Ltd)；电热恒温干燥箱(Q/BKYY31-2000，上海跃进医疗器械厂)、无菌操作台(FD-01，苏州净化设备厂)；紫外分光光度计(SpectrumLab 53 Power，中国Leng Tech公司)； 无菌操作台(FD-01，苏州净化设备厂)。
1.2主要试剂的配制
DNS试剂：称取酒石酸钾钠 122.1674g，放入 400 mL 去离子水中，加热溶解后再加入3,5-二硝基水杨酸 3.15 g，继续加热溶解后加入氢氧化钠 10.5g ，加热溶解后加入苯酚 2.5 g，加热溶解加入Na2SO4#8226;7H2O 4.9972g(期间加热温度控制在60℃以内)，冷却后去离子水定溶至500 mL，贮于棕色瓶中避光保存，放置2周后使用。
4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
1、2024-2024-1学期17-20周～2024-2024-2学期1-2周（2024-12-19~2024-3-3），接受任务、查阅和翻译文献，撰写开题报告；
2、第2周~第3周（2024-2-27～2024-3-10），完成实验前准备工作，配制各实验所需药品。
3、第4周~第5周（2024-4-13～2024-3-24），预实验。
4、第6周~第10周（2024-3-27～2024-4-28），一株土壤高产普鲁兰酶产生菌进行诱变。
