1. 研究目的与意义
1.研究目的
对土壤来源的产蛋氨酸（Methionine，Met）菌株进行复合诱变处理，获得蛋氨酸产生菌的突变菌株。
2.研究意义及背景
1878年，恩格斯提出“生命是蛋白体的存在形式”(《反杜林论》) ，认识到蛋白质对生命的重要性，即蛋白质是人类生命活动最基本的物质之一，在人和动物的营养方面占有极其重要的地位，是供给足够的蛋白质及必需的氨基酸维持健康的重要条件。
植物能合成它所需的全部氨基酸，而人体需要从饮食中摄取一些必需氨基酸，蛋氨酸无法在动物体内合成，需从食物中摄入。
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2. 研究内容和预期目标
1.土壤来源产蛋氨酸菌株的紫外诱变、EMS单因素诱变以及紫外-EMS复合诱变。
2.土壤来源产蛋氨酸菌株复合诱变后产蛋氨酸的定性和定量检测。
3.实验预期获得土壤来源产蛋氨酸菌株复合诱变后的突变株，分析比较诱变前后菌株的蛋氨酸相对产量。
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3. 研究的方法与步骤
1. 实验材料
1.1 试剂配制
（1）硝普钠溶液(10%)：称取硝普钠1.0 g，溶解于10 mL蒸馏水中，现配现用。
（2）生物素母液（1.0%）：称取0.1 g生物素，溶解于10 mL蒸馏水中，制成1.0%的母液，配置发酵培养基时稀释。
（3）硫胺素母液（1.0%）：称取0.1 g硫胺素，溶解于10 mL蒸馏水中，制成1.0%的母液，配置发酵培养基时稀释。
（4）NaOH溶液(10%)：称取NaOH 1.0 g，完全溶解于10 mL蒸馏水中。
（5）生理盐水（0.9%）：称取0.9 g NaCl溶解于100 mL蒸馏水中，由于后续操作需要，此试剂需在121℃灭菌20 min。
（6）硫代硫酸钠溶液（5%）：称取5 g硫代硫酸钠，完全溶解于95 mL蒸馏水中，加入0.1 g碳酸钠，煮沸待用。
（7）考马斯亮蓝G-250试剂：称取50 mg考马斯亮蓝G-250溶于25 mL乙醇（95%）中，加入50 mL磷酸（85%），用蒸馏水定容至500 mL。
（8）标准蛋白质溶液（100 μg/mL）：量取10 mg牛血清蛋白100 mL溶于0.1 mol/L氢氧化钠溶液。
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4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
1. 2024-2024-1学期17-20周～2024-2024-2学期1-2周（2024-12-19~2024-3-3），接受任务、查阅和翻译文献，撰写开题报告；
2. 第2周~第3周（2024-2-27～2024-3-10），完成实验前准备工作，配制各实验所需药品。
3. 第4周~第5周（2024-3-13～2024-3-24），预实验。
4. 第6周~第10周（2024-3-27～2024-4-28），土壤来源的蛋氨酸产生菌的活化、L-Met标准曲线制作、蛋白质标准曲线测定、蛋氨酸产生菌生长曲线测定以及紫外诱变和EMS诱变最佳条件的确定。
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