1. 研究目的与意义
一、毕业设计(论文)的内容1、小鼠肝纤维化模型的建立2、三棱对小鼠肝损伤的作用研究3、三棱对小鼠炎症的作用研究4、三棱对小鼠肝组织纤维沉积的作用研究5、三棱体内抑制HSCs活化作用研究二、毕业设计(论文)的意义荆三棱(Bolboschoenus yagara Ohwi),为莎草科藨草属植物,其干燥块茎作为中药三棱在临床上使用,味辛、苦,性平,归肝、脾经,具有破血行气、消癥化积的功效,常用于治疗癥瘕痞块、瘀血经闭、食积胀痛。
三棱在临床上通常与莪术、丹参等配伍联用于治疗肝纤维化、肝硬化等慢性肝病,其配伍使用能够降低肝纤维化大鼠的炎症因子表达,并保护肝细胞、抑制细胞凋亡,对自身免疫性肝纤维化有治疗作用;与莪术、鳖甲配伍使用能改善血清肝功能,减轻炎症和肝脏病理结构改变,并降低α-肌动蛋白(α-SMA)的表达和胶原纤维沉积。
三棱参与配伍的复方制剂抗纤I号在血清肝功能指标上有明显改善,甚至优于西药对照组,肝脏病理情况改善,I、III型胶原和TGF-β1,NF-κB表达都明显降低,细胞凋亡减少,抑制HSCs活化增生。
2. 文献综述
肝纤维化发病机制及研究进展摘 要:肝纤维化是各种病因引起的慢性肝病进展至肝硬化的必经阶段,肝纤维化是一个由多种细胞因子和分子途径参与的复杂病理变化,目前,临床上尚无理想的治疗药物,而中医中药在防治肝纤维化的临床和实验基础上,总结出一些较为有效防治肝纤维化的方法。
关键词:肝纤维化;机制;细胞因子;CCl4肝纤维化模;活血化瘀中药前言:肝纤维化是机体对慢性损伤的主动性修复反应以肝脏细胞外基质(Extra-cellular matrix, ECM)的增生与沉积为特征,形态上表现为肝窦毛细血管化与肝小叶内纤维化,功能上可引起肝功能减退、门静脉高压等,严重影响患者的生命健康。
目前研究普遍认为,在肝纤维化发生发展的过程中,肝星状细胞(HSC)的激活与增殖处于关键环节。
3. 设计方案和技术路线
1、研究方案腹腔注射CCl4诱导建立小鼠肝纤维化模型,并同期给药三棱乙酸乙酯部位,造模给药结束后采集样本。
测定小鼠肝功能指数ALT、AST水平;通过肝组织HE、天狼猩红染色观察肝组织病理学变化;ELISA测定炎性因子TNF-α、IL-6和转化生长因子TGF-β1的含量;免疫组化检测纤维蛋白成分α-SMA、collagen I的表达;Western blot检测TGF-β1、α-SMA的蛋白表达水平。
本研究从肝功能、肝损伤、炎症、纤维沉积以及HSCs活化多角度探讨三棱乙酸乙酯部位对小鼠肝纤维化的影响。
4. 工作计划
2022.1.10~2022.3.17:文献研究,完成文献综述,实验方案的完善和实验技术的学习。
2022.3.18~2022.4.18:完成小鼠肝纤维化动物模型的建立。
2022.4.20~2022.4.30:完成小鼠血清ALT、AST含量测定,及ELISA检测炎症因子及TGF-β1的含量。
5. 难点与创新点
炎症是化学损伤、病毒、酒精和脂肪导致的慢性肝病的最典型特征之一。
炎症存在于肝病所有阶段,并且与纤维化、肝硬化和肝癌的发展密切相关。
这些炎症反应由细菌分子介导,通过Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)激活,促进炎症因子(TNF-α,IL-6等)的表达。
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