1. 研究目的与意义
内容：血小板在正常机体内主要发挥重要的止血作用，但是大量的研究显示，血小板和肿瘤之间存在相互作用关系，以往的研究主要集中于血小板与肿瘤之间形成癌栓促进肿瘤转移，以及血小板在肿瘤血管生成中的促进作用。
血小板作为残缺的细胞器，主要通过分泌多种细胞因子以及粘附发挥作用，但是，目前对于肿瘤细胞于血小板之间的作用研究，鲜有对血小板释放物质对肿瘤增殖、迁移作用的生物学行为研究。
本研究针对血小板释放物对肿瘤细胞增殖、迁移作用的影响为切入点，探讨活血化瘀中药丹参中有效成分丹参素对血小板介导肿瘤细胞增殖以及迁移的影响。
2. 文献综述
血小板对肿瘤生物学行为影响的研究进展张巧云 南京中医药大学12中药特色班摘 要：血小板是一种特殊的无核血液细胞，已有研究显示，血小板除了发挥止血功能外，还参与了肿瘤的发展过程。
一方面，肿瘤细胞诱导血小板聚集(TCIPA)，形成癌栓。
另一方面，血小板募集肿瘤微环境中相关因子，与肿瘤细胞相互作用，促进肿瘤细胞的增殖、扩散及转移。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:1）制备血小板与黑色素瘤细胞孵育液；2）MTT验证孵育液对肿瘤黑色素瘤细胞增殖作用的影响；MTT法，又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。
其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
4. 工作计划
第一阶段：2022年2月21日-3月10日文献综述，思路形成，实验方案制定；订购实验药品、试剂。
第二阶段：2022年3月11日-4月15日完成实验一（制备血小板与黑色素瘤细胞孵育液）、实验二（MTT验证孵育液对肿瘤黑色素瘤细胞增殖作用的影响）和实验三（CFDA SE细胞增殖示踪荧光探针验证丹参素对孵血小板诱导肿瘤黑色素瘤细胞增殖作用的影响）第三阶段：2022年4月16日-5月5日完成实验四（肿瘤细胞激活的血小板上清液孵育液对肿瘤细胞克隆形成）、实验五（ELISA检测孵育液TGF-β、IL-6等相关因子的释放）和实验六（Western Blot检测相关因子的增殖、迁移相关蛋白表达）第四阶段：2022年5月6日-6月4日整理、分析、处理实验数据，书写毕业论文，准备答辩。
5. 难点与创新点
本研究首次针对肿瘤细胞激活的血小板释放物对肿瘤细胞增殖、迁移作用的影响；探讨了临床常用活血化瘀中药丹参中有效成分丹参素对血小板介导肿瘤细胞增殖以及迁移的影响。
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