1. 研究目的与意义
内容：药物进入体内，在药物代谢酶的作用下，化学结构发生改变的过程又称药物代谢，对于药物来说，代谢会直接影响其药效的发挥，同时也是药物体外活性和体内活性有差异的主要原因。
CYP450酶是人体内最重要的代谢酶之一，主要通过催化氧化、还原、水解等反应，参与内源性物质和外源性药物的代谢。
其主要分布在生物体肝脏中，同时也广泛分布于肠、肾脏、肺、脑、血浆等组织器官。
2. 文献综述
CYP450s体外抑制效应筛选体系概述摘要：目前临床上多数患者常常需要多种药物联合使用，当两种药物合用时，可能发生药物-药物相互作用（drug-drug interactions，DDIs）。
基于药代动力学的DDIs分为吸收（absorption）、分布（distribution）、代谢（metabolism）、排泄（excretion）四个阶段，其中药物代谢的相互作用最易发生，主要原因是药物对代谢酶活性的抑制作用。
其主要表现是一个药物通过降低 CYP450酶的活性，减慢合用药物在肝脏的代谢，从而使得合用药物产生疗效增强甚至毒性，进而引发不良反应。
3. 设计方案和技术路线
设计方案： 1. 根据代谢物的标准品，基于LC-MS/MS，建立其同步检测的分析方法。
2. 温孵反应体系温孵试验反应体系由0.1mol/L K2HPO4缓冲液（pH=7.4）组成，其中含氯化镁10mmol/L，NADPH生成系统（1.5mmol/L辅酶Ⅱ（NADP ）、1.5U/mL葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（PDH）和10mmol/L葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）），肝微粒体蛋白的浓度为0.25mg/mL，体系中包含系列底物别为非那西丁、安非他酮、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、右美沙芬、氯唑沙宗、睾酮、咪达唑仑；临用前将各标品溶液稀释至相应浓度并混合，再加入适量待考察药物。
反应体系的终体积为0.2 mL。
4. 工作计划
初步建立研究方案，并且进行了一些实验。
1.确立了分析条件（色谱参数，质谱参数）2.样品处理条件（适宜浓度，时间）
5. 难点与创新点
1.基于肝微粒体体系，建立包含4种主要CYP450亚型的代谢酶抑制效应筛选方法2.对该筛选方法进行验证，并将其应用于药物对肝微粒体细胞色素酶（CYP450）的体外抑制作用的研究
