1. 研究目的与意义
一、毕业设计内容
胆木为茜草科乌檀属乔木乌檀Nauclea oftcinalis Pierrc ex Pitard的干燥根茎是我国少数民族黎族民间常用药，具有清热解毒、消肿止痛、抗菌消炎之功效。临床上用于治疗急性扁桃体炎、咽炎、结膜炎以及上呼吸道感染等症状。细胞因子是一组调节细胞反应的蛋白质包括一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF-α）以及白介素（IL）,由体内多种细胞如巨噬细胞、平滑肌细胞、内皮细胞等产生分泌。重感染情况下，细胞因子分泌过多将导致过度炎症反应。NF-κB是一种普通存在的，具有多向转录调节作用的核转录因子，是LPS所介导的信号转导通路中最重要的下游通路。IκBα是 NF-κB 的内源性抑制因子。当LPS刺激巨噬细胞后，NF-κB（p65）和IκBα将被磷酸化，从而激活细胞内炎症信号通路NF-κB，导致细胞核内相关炎症因子和介质的基因表达发生变化，刺激合成和释放众多内源性生物活性因子，包括NO、TNF-α、IL-1β和IL-6，产生炎症反应。
本论文将脂多糖（LPS）作用于RAW264.7小鼠巨噬细胞，MTT法检测不同浓度胆木提取物对细胞活力的影响从而确定胆木提取物的浓度。然后用Griess试剂法测定胆木对巨噬细胞产生NO的影响，在此基础上分别用ELISA试剂盒和实时定量荧光PCR技术测定胆木浸膏对LPS刺激的RAW264.7细胞产生的iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6水平及其蛋白表达，从炎症抑制方面阐述胆木的抗炎作用。最后采用westernblot技术检测胆木对LPS诱导的RAW264.7细胞的NF-κB（p65）和IκBα信号通路的影响，为胆木的抗炎机制提供更深入的了解。通过以上实验来探讨胆木的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控。
2. 文献综述
文献综述
3. 设计方案和技术路线
一、研究方案：
1、本论文将脂多糖（LPS）作用于RAW264.7小鼠巨噬细胞，MTT法检测不同浓度胆木对细胞活力的影响从而确定胆木浓度。然后用Griess试剂法测定胆木对巨噬细胞产生NO的影响，在此基础上分别用ELISA试剂盒和实时定量荧光PCR技术测定胆木对LPS刺激的RAW264.7细胞产生的iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6水平及其蛋白表达，从炎症抑制方面阐述胆木的抗炎作用。最后采用westernblot技术检测胆木对LPS诱导的RAW264.7细胞的NF-κB（p65）和IκBα信号通路的影响，为胆木的抗炎机制提供更深入的了解。通过以上实验来探讨胆木的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控。
4. 工作计划
第一阶段：2022.01-02文献综述，思路形成，实验方案制定；
第二阶段：2022. 03-4初步试验、实验条件选择；
第三阶段：2022.4-5进行实验研究；
5. 难点与创新点
一、特色
胆木是一类特色民族新药，疗效确切，副作用极少，有很好的市场前景。大部分文献集中于研究胆木有效成分，胆木的药理作用，现有文献报道研究胆木及其单体的抗炎作用，但是未见对其抗炎机制研究。本论文以RAW264.7小鼠巨噬细胞为模型,研究胆木的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控，或许可以为胆木进一步临床应用提供科学依据。
二、创新
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