1. 研究目的与意义
1、主要内容
内容主要为香附四物方组分的分离与分析,将香附四物方采用水提醇沉工艺得到的主要活性物质采用大孔树脂吸附 不同浓度乙醇洗脱收集得到7个组分群(XFSW-1~7),同时制备挥发油部分(XFSW-O),分别采用HPLC和GC-MS分析成分组成并测定含量。
2. 文献综述
中药有效成分提取分析方法概述
摘 要:中医药发展已上升为国家战略,迎来了中医药发展的黄金时代。而在整个中医药研究中,中药有效成分的分析处于至关重要的地位,它的发展有利于中药的科学提取及炮制,有利于中药配伍及药效机制的阐明,有利于中药及制剂的质量检测及标准的制定,有利于药物筛选及新药的研发。可以说中药的药效物质基础研究,即具有临床疗效的中药有效成分分析是影响中药国际化、走向世界的关键一步。本文着重从中药提取、分离、分析三个方面介绍中药有效成分分析的方法、技术。
关键词:中药;提取;分析;方法
3. 设计方案和技术路线
取当归、川芎、白芍、熟地、木香、香附、延胡索(6:3:3:8:2:3:3)药材饮片21kg,加10倍量水浸泡12小时后连续煎煮2次,同时水蒸气蒸馏提取挥发油(XFSW-O)。合并2次药液,减压加热浓缩至生药浓度为1 g/mL,加入95%乙醇,至药液达到80%酒精度(V/V),静置24小时后取上清液浓缩至无醇味(前期研究结果已经表明沉淀物未见显著活性),浓缩液经D-101 大孔吸附树脂以水、10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇梯度洗脱,分别收集上述7种洗脱液并干燥即得相应组分(XFSW-1~XFSW-7)。前期研究表明60%乙醇以上浓度洗脱液的组分得率极低,因此浓度范围设置为0~60%乙醇。提取分离流程如下图所示。
将上述组分(XFSW1~7)用50%甲醇溶解并稀释到一定浓度,采用UPLC-Q-TOF-MS分析成分。色谱条件:UPLC-C18柱(2.lmm50mm,1.7μm);流动相:A(乙腈),B(0.5%甲酸水溶液),采用A-B两相梯度洗脱。
4. 工作计划
(一)、准备阶段(2022年1月-2月)
1、确定选题,制定课题研究实验方案,完成课题方案的开始实践论证;
2、查阅文献进行探讨研究,了解四物汤组分的研究进展及着手改进;
5. 难点与创新点
有关测定天然药物含量的文献较多,但对香附四物汤整方的实验研究较少,尽管已有文献报道HPLC法测定单味中药及四物汤中活性成分,但还未见香附四物汤复方中多种活性成分的HPLC法测定。
因此本文采用高效液相色谱法二极管阵列检测器(HPLCDAD)对香附四物汤活性部位中多种活性成分的含量测定方法,并使用液质联用技术,阐明该活性部位的效应物质,确定效应物质在复方中的含量。
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