1. 研究目的与意义
内容：重楼为百合科植物云南重楼Paris polyphylla Smith var. yunnanensis(Franch. ) Hand. -Mazz .或七叶一枝花Paris polyphylla Smith var. chinensis (Franch.) Hara的干燥根茎。重楼醇提物具有较好的抗肿瘤效果，尤其是针对化疗药物耐药的肿瘤细胞效果较为显著。重楼含有多种活性化学成分，其中甾体皂苷类化合物为其主要活性物质。近年来，随着药理学研究的不断深入，重楼的药用价值越来越受到重视。但目前针对重楼其他活性成分的药理研究尚未展开，且对皂苷类成分的研究也停留在初期阶段。现代药理研究表明，重楼属植物可用于鼻咽癌、肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、子宫肌瘤、白血病等疾病的治疗，其抑制肿瘤细胞的机制可能与调节细胞凋亡相关蛋白的表达、改变与肿瘤细胞生长的相关蛋白活性、抑制肿瘤细胞生长周期及其内皮细胞的迁移和毛细血管形成等有关。由此可见，重楼属植物具有一定的抗肿瘤作用，这些为本课题研究中药重楼抑制骨肉瘤的作用提供方法和途径，本课题旨在对重楼抑制骨肉瘤的活性成分及其作用机制进行相关研究。
意义：骨肉瘤（osteosarcoma, OS）是骨组织中最常见的恶性肿瘤，在我国，骨肉瘤的发病率约为3 / 100 万，占恶性肿瘤的0.2%。大部分骨肉瘤发生在四肢长管状骨，特别是股骨远端、胫骨近端干骺端，占90%的病例。骨肉瘤的恶性程度高，它的发病高峰出现在24岁以下的年轻人，即儿童和青少年，男性发病率高于女性，严重威胁着患者身心健康。早期的骨肉瘤患者，若诊断明确尚无肺转移，应施行高位截肢术或关节离断术，随后化疗。骨肉瘤患者一旦被诊断发生肿瘤转移，五年无病生存率不到20%。由此可见，虽然骨肉瘤的发病率不是很高，但是一旦确诊，就要面临截肢和死亡，给青少年患者带来巨大的生理及心理痛苦。虽然骨肉瘤患者不是人群中的大多数，但是我们也需要为他们做点什么。目前的治疗手段虽然已经提高了骨肉瘤的 5 年生存率，但距离满意的治疗效果仍有很长的路要走，如今需要迫切研发新的药物和采取新的治疗策略。中药重楼及其有效成分主要通过抑制肿瘤细胞增殖诱导细胞凋亡、抑制肿瘤血管生长、调节机体免疫功能、逆转肿瘤细胞多药耐药性等机制发挥抗肿瘤的作用。因此，中药重楼在抑制骨肉瘤这方面或许具有很好地潜力。本课题旨在深入地对重楼活性成分进行深入地研究，更好的发挥重楼在抗肿瘤方面的应用。
2. 文献综述
重楼醇提物抑制骨肉瘤的活性成分及作用机制研究
摘 要：重楼为百合科植物云南重楼Paris polyphylla Smith var. yunnanensis(Franch. ) Hand. -Mazz.或七叶一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis (Franch. ) Hara的干燥根茎。其主要化学成分有甾体皂苷类、黄酮类、三萜类、脂肪酸类等，具有抗肿瘤、抗菌、止血、驱虫等药理作用。目的: 介绍中药重楼的化学成分及其抗肿瘤作用研究概况。方法: 查阅国内5年来相关文献资料并进行分析和综述。结果: 重楼醇提物、重楼总皂苷以及重楼化学成分单体中的重楼皂苷I、II、VI、VII、H等都具有抗肿瘤的作用。结论: 重楼化学成分具有一定的抗肿瘤作用，为研究中药重楼抑制骨肉瘤的作用机理提供方法和途径。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：1.用乙醇提取重楼中的活性成分，得到重楼醇提物。
2.采用高效液相色谱法（HPLC）将重楼醇提物中的化学成分主要是甾体皂苷进行定性定量分析。
3.使用MTT法，MTT全称为3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，汉语名称为3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐，检测中药重楼对人骨肉瘤细胞的细胞增殖及细胞活性测定。
4. 工作计划
第一阶段（第1周至第2周）：确定选题、收集相关资料
第二阶段（第3周）：文献调研与综述
第三阶段（第4周）：撰写开题报告与开题
5. 难点与创新点
1. 重楼醇提物可用于鼻咽癌、肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、子宫肌瘤、白血病等疾病的治疗，但是未见关于研究重楼和骨肉瘤的相关文献。本课题将中药重楼应用到骨肉瘤的治疗中，为重楼的开发利用提供科学依据。
2.重楼醇提物含有多种活性化学成分，其中甾体皂苷类化合物为其主要活性物质。但目前针对重楼其他活性成分的药理研究尚未展开，且对皂苷类成分的研究也停留在初期阶段。本课题将对重楼抑制骨肉瘤的活性成分进行相关研究。
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