中药与神经保护的细胞学研究开题报告

1. 研究目的与意义

各方面资料显示，中国已进入老龄化社会并呈加速态势发展。中国现有老龄人口已超过1.6亿，且每年以近800万的速度增加。预计到2050年，中国老龄人口将达到总人口的三分之一。老年人口的快速增加，特别是80岁以上的高龄老人和失能老人年均100万的增长速度，对老年人的生活照料、康复护理、医疗保健、精神文化等需求日益凸显，养老问题日趋严峻。在老龄化疾病中，神经退行性痴呆症，又称阿尔茨海默症（Alzheimersdisease，AD）或老年痴呆症，是一类高发疾病。临床早期最显著的症状为以记忆力受损的记忆障碍、掌握运用新知识与社交能力下降等认知障碍、并伴随有抑郁、情感淡漠或焦躁不安、注意力涣散等精神障碍。据统计，1990年，中国人群中AD患者为193万，2000年为380万，2010年统计数字已上升为568万，发病增长率惊人。因此，神经退行性痴呆症已成为老龄化社会中危害公众健康的重大公共卫生问题，迫切需要低毒高效创新药物。

加味开心散由人参、远志、石菖蒲、茯苓、麦冬、五味子、郁金、栀子、银杏叶组成，是经临床验证有效的用于治疗神经退行性痴呆症的方剂。但作用机理不明，阻碍了其作为有效抗神经退行性痴呆症药物的开发。

神经元损伤是神经退行性痴呆症的重要病理机制，在谷氨酸等损伤因素下，神经元功能受损，导致神经递质和神经营养因子表达显著的下降，致使神经传导与神经可塑性降低，从而产生记忆障碍。因此，抗神经元氧化损伤是抑郁症药物开发的重要靶点。因此，该课题的研究主要包括二方面的内容：

2. 文献综述

中药与神经保护的细胞学研究

王晓洁

【摘要】通过查阅相关文献，对精神分裂症、抑郁症、阿尔兹海默症和帕金森这四种神经损伤性疾病进行了整理研究。中药有效成分在神经保护机制上具有多靶点、多途径的优势，在神经损伤性疾病的预防和治疗方面有巨大的潜力。

3. 设计方案和技术路线

研究方案：

i.H2O2损伤模型：将HT22细胞以1x105细胞/孔密度种于6孔细胞培养板中，培养基采用DMEM 10%胎牛血清 1%青霉素/链霉素，置于37oC，5.0%CO2培养箱。加入不同浓度的加味开心散有效成分的培养基溶液48小时后，然后加入H2O2，培养1小时，确定合适的损伤浓度。MTT法检测细胞存活率，评价加味开心散有效成分对H2O2损伤神经细胞的保护作用与效用范围。

ii.谷氨酸损伤模型:同上法培养HT22细胞以系列浓度的谷氨酸造模（10、20、40、60、80、160 mmol/L），确定合适的损伤浓度。加入含加味开心散提取物的培养基溶液48小时后，以确定浓度的谷氨酸损伤细胞。MTT法检测细胞存活率，评价加味开心散有效成分对谷氨酸损伤神经细胞的保护作用与效用范围。

4. 工作计划

5. 难点与创新点

神经元损伤是神经退行性疾病的重要病理基础，加味开心散是临床有效的治疗方剂，但作用机理不明，本研究选择神经保护为作用靶点，研究加味开心散有效成分效用，有利于揭示加味开心散的作用机制，为后续的新药开发奠定基础。

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