HPLC-ELSD法测定护肝片中猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量开题报告

 2023-01-09 09:01

1. 研究目的与意义

护肝片具有疏肝理气、健脾消食和降低转氨酶的功效，临床上主要用于慢性肝炎及早期肝硬化。《中国药典》标准护肝片的处方中含有猪胆粉成分，猪胆粉由猪胆汁通过滤过、干燥、粉碎的工艺制成；主要含有猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸等活性成分。由于猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的紫外吸收均为末端吸收，用高效液相色谱紫外检测法（HPLC-UV法）灵敏度低，且仪器噪音及溶剂对结果影响较大；因此，采用高效液相色谱蒸发光散色检测法（HPLC-ELSD法）对猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量进行测定，该方法准确、简便、灵敏度高，为护肝片的质量标准提供参考。

笔者对护肝片样品预处理的具体步骤是：护肝片在氢氧化钠碱性条件下高温加热水解，得游离型的胆酸钠，再进行酸化后，用乙酸乙酯提取，蒸干，用乙醇溶解，提取物用高效液相色谱蒸发光散色检测法测定猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量。

2. 文献综述

HPLC-ELSD法测定护肝片中猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量（综述）

耿 笑

( 南京中医药大学药学院，江苏南京 210023)

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3. 设计方案和技术路线

研究方案：护肝片在氢氧化钠碱性条件下高温加热水解，得游离型的胆酸钠，再进行酸化后，用乙酸乙酯提取，蒸干，用乙醇溶解，提取物用高效液相色谱蒸发光散色检测法测定猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量；再通过对线性关系、精密度试验、重复性试验、稳定性试验、加样回收率试验等系统方法学考察，最终确定护肝片质量。

技术路线：护肝片-氢氧化钠水解-冷却，定容-离心-盐酸酸化-乙酸乙酯提取-提取物-HPLC-ELSD法测定-数据分析-总结，讨论

4. 工作计划

2022.1.4～2022.1.16熟悉镇江市药品检所业务工作，并整理实验报告。

2022.1.19～2022.2.24通过讨论初步确定研究方向与研究课题，查阅相关文献，同时了解整个实验过程。

2022.2.25～2022.3.8完善实验方案，并学会基本的实验操作技能。

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5. 难点与创新点

1. 采用HPLC-ELSD法测定含量，方法简便、灵敏度高。

2. 对猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的提取条件（如：氢氧化钠的浓度以及用量、加热水解时间等）进行优化。

3.探索不同的蒸发光散射检测法条件。
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