PD-L1在哺乳动物中的表达、纯化开题报告

 2022-12-27 11:12

1. 研究目的与意义

内容:1.PD-1/PD-L1的结构和表达2. PD-L1的作用机制3. PD-L1的信号通路与T细胞免疫4. PD-L1信号通路在肿瘤中的作用意义:PD-L1在肿瘤细胞表面的过表达会增强癌细胞抵抗机体免疫系统的攻击能力,是肿瘤发生、发展和转移的重要因素。

PD-1/PD-L1信号通路作为调节T细胞增殖和分化的重要抑制信号通路,从而阻断PD-1/PD-L1信号通路为肿瘤、自身免疫病等疾病的治疗提供了新的研究方向。

目前,PD-1/PD-L1信号通路抑制剂在抵抗恶性肿瘤的重要作用得到广泛重视。

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2. 文献综述

PD-L1表达调控机制和功能的研究进展【摘要】程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)和程序性死亡配体(PD-L1)作为一对重要的负性调控因子,在机体的的适应性免疫中发挥了重要的作用。

PD-1与其受体PD-L1相结合,能够抑制机体内T细胞的增殖和活化,使机体免受自身免疫系统的攻击。

本文论述了PD-L1的作用机制、信号通路与T细胞免疫和其在肿瘤中的作用以及PD-1/PD-L1抗体药物的最新研究进展。

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3. 设计方案和技术路线

研究方案:1.质粒的构建(设计引物-PCR扩增)2. PD-L1抗体的表达和鉴定3. PD-L1抗体的纯化4. PD-L1抗体的检测技术路线:培养细胞→细胞转染、表达→收集细胞上清→蛋白纯化→跑SDS聚丙烯胺凝胶电泳鉴定蛋白→HPLC高效液相鉴定蛋白纯度。

4. 工作计划

第一阶段:2022年9月:查阅文献,制定实验方案;第二阶段:2022年10月:学习掌握基本的实验技术;第三阶段:2022年11月-12月:选择合适的实验方法进行实验研究;第四阶段:2022年2月至5月:补充实验,整理数据,撰写论文。

5. 难点与创新点

本课题针对其关键的实验流程和实验数据进行不断验证,实现最终抗体的QC放行,同时增加了大量的实验检测方法,保证了实验数据的准确性。

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