1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
通过本实验室已有的二花脸猪前体脂肪细胞不同分化时间点的RNA转录测序数据分析，发现长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）随着脂肪分化表达量不断上升。
我们猜测它在脂肪分化过程中扮演着重要的作用。
长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）是长链脂酰辅酶A合成酶家族之一，在脂肪的合成和脂肪酸的β-氧化过程中起到重要作用[1]，并在蛋白质修饰，蛋白激酶C化活，细胞蛋白质的转运，细胞增殖及核内甲状腺激素受体等方面具有调节作用[2]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）在二花脸猪前体脂肪细胞的分化过程中具有密切的联系，与长链脂酰辅酶A合成酶1关联的许多调控过程，对长链脂酰辅酶A合成酶1影响脂肪细胞的分化发挥了极为关键的作用。
本试验旨在研究通过全转录组测序筛选后的长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）基因在二花脸猪的不同组织器官中的表达差异，沉默长链脂酰辅酶A合成酶1后脂肪细胞的分化情况，并探索该基因对猪前体脂肪细胞分化的影响，为深入研究长链脂酰辅酶A合成酶1影响二花脸猪脂肪沉积提供新的线索。
研究内容：1. 采集3头小猪的心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪等组织，构建ACSL1的基因组织表达谱。
3. 研究的方法与方案
研究方法：猪前体脂肪细胞的采集和培养、RNA提取、RNA-Seq、qRT-PCR、油红O染色、甘油三酯测定、细胞转染、生物信息学分析等。
技术路线：3头小猪的心、肝等组织的采集→ACSL1基因组织表达谱的构建3头小猪前体脂肪细胞的采集与培养→设计合成ACSL1-siRNA 12孔细胞培养脂肪细胞达到80% 转染siRNA（培养48h）→收集RNA样 反转录为cDNA 荧光定量测定ACSL1基因表达量→荧光定量pparγ、cebpa、FABP4等基因的表达量转染siRNA（培养8h）→换为诱导液培养8天→油红O染色→甘油三酯测定实验方案：1. 二花脸猪ACSL1基因在不同组织中的转录1.1 二花脸猪各组织总RNA的提取采集猪心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪组织，Trizol法提取RNA。
1.2 反转录将提取的RNA反转录为cDNA。
4. 研究创新点
猪肉的脂肪沉积及肉质质量已经成为国内外关注的热点科学问题，本试验研究的正是影响猪前体脂肪细胞分化的内在因素，为深入研究长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）影响二花脸猪脂肪沉积提供新的线索。
对以后研究猪脂肪细胞的分化沉积机理提供新的一种理论支持，对于减少猪的脂肪也具有实践意义。
5. 研究计划与进展
2017.6-2017.10 上课，阅读文献。
撰写文献综述2017.10-2018.3 脂肪细胞培养；ACSL1-siRNA的合成与细胞转染；不同组织ACSL1基因表达谱的构建2018.3-2018.4 沉默ACSL1基因获得干扰效率；干扰后的细胞分化表型2018.4-2018.6 试验数据整理，撰写论文与准备答辩
